7장, 생물안전 매뉴얼: 오염 제거

생물학적 작용제에 의해 오염된 배양물과 물체의 오염 제거는 미생물학 실험실에서 일상적으로 수행됩니다. 오염 제거는 미생물학적 안전 관행의 필수 구성 요소이며 실험실 직원(및 다른 사람)을 감염으로부터 보호하고 감염성 유기체가 외부 환경으로 방출되는 것을 방지하는 역할을 합니다. 배양 유기체의 오염을 방지하려면 배지, 작업 표면 및 장비의 오염 제거도 필요합니다.

항균제를 사용하여 작업 표면, 장비, 생물학적 안전 캐비닛 및 기타 무생물의 오염을 제거하는 것을 소독이라고 합니다. 여러 가지 화학 약품이 소독제로 사용됩니다. 실험실 작업자는 이러한 모든 화학적 소독제와 관련된 위험이 있음을 기억해야 합니다. 흡입 및 피부 접촉을 최소화하고 눈 접촉을 피해야 합니다. 이러한 화학물질을 취급할 때는 항상 적절한 장갑과 보안경을 착용해야 합니다.

화학적 소독제에 대한 미생물의 민감성은 물리적 구조와 물리적 상태(예: 저항성 포자 상태)에 따라 다릅니다. 예를 들어, 마이코박테리아의 왁스 같은 외부 세포벽은 저항력을 증가시킵니다. 외부 캡시드에 지질이 부족한 바이러스는 친유성 바이러스보다 더 친수성이고 일반적으로 화학적 소독제에 대한 저항성이 더 높습니다. 화학적 소독제에 대한 미생물의 저항성 순서는 가장 저항성이 높은 것부터 가장 낮은 것까지 다음 페이지에 나와 있습니다.

다음은 화학적 소독제에 대한 미생물의 저항성 목록입니다. 저항성이 가장 높은 것부터 저항성이 가장 낮은 것 순으로 나열되어 있습니다.

* 생물학적 안전: 원칙 및 관행, Fleming, DO 및 Hunt, DL, eds, 4판(2006), ASM Press, Washington, DC에서 채택됨

일부 일반적인 화학 소독제에 대한 관련 정보는 이 장 끝에 표 형식으로 요약되어 있습니다.

오토클레이브는 압력(약 15psi) 하에서 포화 증기를 사용하여 오토클레이브 온도를 최소 121°C(250°F)로 유지합니다. 고압멸균은 영양 박테리아, 박테리아 포자 및 바이러스를 파괴하는 데 사용될 수 있습니다. 생물학적 유해 폐기물의 오염을 제거할 때 폐기물의 온도는 최소 20분 동안 최소 115°C에 도달하는 것이 좋습니다. 이러한 조건을 충족하는 데 필요한 총 처리 시간은 여러 부하 요인에 따라 달라집니다(아래 참조). 그러나 생물학적 유해 폐기물의 오염을 제거할 때는 최소 1시간의 오토클레이브 주기를 사용해야 합니다.

오토클레이브의 효율성을 결정하는 세 가지 요소가 있습니다.

온도 - 오토클레이브는 약 15psi의 압력에서 증기를 사용하여 최소 121°C의 챔버 온도를 달성합니다. 오토클레이브 챔버가 121°C에 도달할 수 있지만 이것이 반드시 화물 내부가 이 온도에 도달한다는 의미는 아닙니다.

시간 - 일반적으로 깨끗한 품목의 멸균에는 챔버 온도 121°C에서 최소 20분의 오토클레이브 사이클 시간(오토클레이브 사이클이 시작되자마자 시간이 시작되지 않음)이 권장됩니다. 그러나 오염 제거를 달성하는 데 필요한 총 처리 시간은 적재물 컨테이너(열 전달 특성), 적재물에 포함된 물의 양, 적재물의 무게를 포함한 여러 적재 요소에 따라 달라집니다. 부하가 증가하면 효과적인 오염 제거를 위해 더 긴 사이클 시간이 필요합니다. 생물학적 유해 폐기물을 처리하려면 최소 60분의 고압멸균 시간이 필요합니다. 60분의 최소 오토클레이브 시간에 대한 면제는 사례별로 고려되며 생물안전 담당관 또는 기관 생물안전위원회의 승인을 받아야 합니다. 면제 요청은 생물학적 유해 폐기물, 오토클레이브 조건, 오토클레이브 시간, 오토클레이브 효능 테스트 절차 및 테스트 빈도를 설명하는 서면 SOP와 함께 생물안전 담당관에게 제출해야 합니다. 어떠한 경우에도 30분 미만의 고압멸균 시간은 승인되지 않습니다.

접촉 - 최대 열 전달을 위해서는 증기 포화가 필수적입니다. 증기는 화물의 모든 영역에 접촉해야 합니다. 오토클레이브 백과 기타 용기는 적절한 접촉을 보장하기 위해 부분적으로 열려 있어야 합니다(또는 증기가 유입되도록 허용). 연구에 따르면 백 내부에 물을 추가하면 오토클레이브 사이클의 시간-온도 프로파일이 향상되어 오토클레이브의 멸균 효율성이 증가하는 것으로 나타났습니다.